Estándares de prueba para proteasa en preparaciones enzimáticas
ICS 67.220.20
Cnº de lasificación: X69
GB/T 23527-2009
PAGEstándares Nacionales de la República Popular China
Preparaciones de proteasa
Emitido el: 2009-04-27
Implementado: 2009-11-01
Expedido por:PAGAdministración General de Supervisión de Calidad, Inspección y Cuarentena de la República Popular China y Comité Nacional de Gestión de Normalización de China
Prefacio
Esta norma se basa en QB 1805 – 1993 (Método de prueba general para preparaciones de enzimas industriales) y QB 1805.3 – 1993 (Preparación de proteasa industrial).
El Apéndice B de esta norma es un apéndice normativo, mientras que los Apéndices A, C y D son informativos.
Este estándar fue propuesto por el Consejo Nacional de la Industria Ligera de China.
Esta norma está bajo la jurisdicción del Subcomité Técnico de Fermentación Industrial del Comité Técnico Nacional de Normalización de la Industria Alimentaria.
Esta norma fue redactada por: Novozymes (China) Biotechnology Co., Ltd., Zhangjia Port Jinyuan Biochemical Co., Ltd., China Food Fermentation Industry Research Institute, Shandong Longda Bioengineering Co., Ltd., Zhaodong Richeng Enzyme Preparations Co., Ltd., Xingtai Xinxin Xiangyu Bioingeniería Co., Ltd., Wuxi Saide Bioingeniería Co., Ltd. y Beijing Donghua Qiangsheng Biotechnology Co., Ltd.
Los principales redactores de este estándar son: Jingxue Zhang, Yongqi Li, Wei Zhang, Qingwen Guo, Yong He, Bo Yu, Bingyan Wu, Zhenyu Cao, Jin Qian y Yue Zhang.
Preparaciones de proteasa
1. Ámbito de aplicación
Esta norma especifica los términos y definiciones, las clasificaciones de productos, los requisitos, los métodos de prueba, las reglamentaciones de inspección, así como los íconos, el empaque, el transporte y el almacenamiento de las preparaciones de Proteasa.
Esta norma se aplica a la producción, inspección y venta de preparados de proteasa obtenidos a partir de almidón (o azúcar) como materia prima, fermentación por microorganismos y purificación.
Esta norma no se aplica a las preparaciones de proteasas extraídas de tejidos animales y vegetales, pero los requisitos de conteo de esta norma pueden usarse como referencia.
Las preparaciones de proteasa utilizadas como aditivos alimentarios y aditivos para piensos, además de los requisitos de esta norma, también deben referirse a los demás requisitos reglamentarios.
2. Referencias normativas
Las cláusulas de los siguientes documentos juntas se convierten en las cláusulas de este documento estándar a través de citas. Para los documentos de referencia fechados, todas las enmiendas posteriores (sin incluir el contenido de las erratas) o revisiones no son aplicables a esta norma. Sin embargo, se alienta a todas las partes que estén de acuerdo con este estándar a estudiar si estos documentos son las últimas versiones. Para los documentos citados sin fecha, se aplica la última versión correspondiente a esta norma.
GB/T 191 Iconos paraPAGembalaje, almacenamiento y transporte
Preparación de reactivos químicos GB/T 601: Solución de titulación estándar
GB 2760 Indicadores higiénicos de aditivos alimentarios
Tamices de prueba de malla de alambre GB/T 6003.1 (GB/T 6003.1 – 1997, eqv ISO 3310-1: 1990)
3. Ttérminos y definiciones
Los siguientes términos y definiciones se aplican a esta norma.
3.1. Proteasa
Una enzima que corta los enlaces peptídicos dentro de las moléculas de proteína y convierte las moléculas de proteína en péptidos y aminoácidos de molécula pequeña.
3.2. Actividad de proteasa
La actividad de proteasa se expresa en unidades de actividad de proteasa y se define como 1 g de polvo de enzima sólida (o 1 ml de enzima líquida). Bajo ciertas condiciones de temperatura y pH, la caseína se hidroliza en 1 min para producir 1 μg de tirosina, lo que representa 1 unidad de actividad enzimática u/g (o u/ml).
4. PAGClasificación del producto
4.1. By Producto Campo de aplicación
1. Productos de clase A: preparados enzimáticos para la industria alimentaria y la industria de piensos
2. Productos Clase B: Preparaciones enzimáticas para otras industrias
4.2. Por formulario de producto
La forma de producto se clasifica en preparaciones enzimáticas sólidas y preparaciones enzimáticas líquidas.
4.3. Por rango de pH del producto
Se clasifica en proteasa ácida, proteasa neutra y proteasa alcalina. Consulte el Apéndice A para conocer las categorías, los códigos y las cepas de producción de las preparaciones de proteasa de uso común en China.
5. Requisitos
5.1. Apariencia
1. Forma sólida:polvo o gránulos de color blanco a marrón amarillento sin aglomeración ni delicuescencia, e inodoro. Hay un olor especial a fermentación.
2. Forma liquida:Líquido de color amarillo claro a tostado con una pequeña cantidad de condensado permitido e inodoro. Hay un olor especial a fermentación.
5.2. Requisitos físicos y químicos
Debe cumplir con los requisitos de la Tabla 1:
Tabla 1 Requisitos físicos y químicos de las preparaciones de lipasa
Articulo | Forma sólida | Forma liquida |
Actividad enzimáticaun, u/g o u/ml≥ | 50000 | |
Pérdida por secadob, (%) ≤ | 8.0 | — |
Finura [0,40 mm (malla 39) Tasa de paso de tamiz estándar]b, %≥ | 80 | — |
un:Puede realizarse de acuerdo con las especificaciones de actividad enzimática estipuladas en el contrato entre el proveedor y el comprador. b:No apto para productos granulares. | ||
5.3. Requisitos higiénicos
Debe cumplir con las reglamentaciones nacionales pertinentes.
6. Método de prueba
6.1. Apariencia
Pesar 10 g (o 10 ml) de la muestra, observar, oler para emitir un juicio y registrar las observaciones.
6.2. Actividad enzimática
Realice las pruebas de acuerdo con el Apéndice B. Los Apéndices C y D también se pueden consultar para realizar las pruebas.
6.3. Pérdida por secado
6.3.1. Aparato
6.3.1.1. Horno de secado eléctrico
6.3.1.2. Balanza analítica: precisión de 0,0001 g
6.3.1.3. Botella de pesaje: 50 mm x 30 mm
6.3.2. Análisis de procedimientos
Use una botella de pesaje seca a peso constante para pesar aproximadamente 2 g de la muestra de enzima con una precisión de ± 0,0002 g. Colóquelo en un horno de calentamiento eléctrico a 103 ºC ± 2 ºC, retire la tapa y colóquelo junto a la botella de pesaje en el lateral. Secar durante 2 horas, retirar, tapar, poner en un desecador para enfriar a temperatura ambiente y pesar.
6.3.3. Cálculo de Resultados
La pérdida por secado se calcula según la fórmula 1:
Fórmula 1. Pérdida por secado
X2 = {(metro1 –metro2) ÷ (metro1 -metro)} x 100
Leyenda:
X2:pérdida de peso seco de la muestra, %;
metro1:La masa de la botella de pesaje y la muestra antes del secado, g;
metro2:La masa de la botella de pesaje y la muestra después del secado, g;
metro:El peso de la botella de pesaje, g.
Los resultados obtenidos se redondearán a un decimal.
6.4. Finura
6.4.1. Aparato
6.4.1.1. Balanza analítica: precisión de 0,0001 g.
6.4.1.2. Tamices estándar:ɸ200x50 – 400/250,uny cumple con las regulaciones de GB/T 6003.1.
6.4.2. Análisis de procedimientos
Pesar 100 g de muestra de enzima sólida, con una precisión de 0,2 g. Coloque el tamiz estándar en la bandeja de tamiz, luego transfiera la muestra de enzima pesada al tamiz estándar. A continuación, cubra y agite durante 5 minutos (batir el lado del tamiz de vez en cuando). Deje reposar durante 2 minutos, retire la tapa superior, transfiera con cuidado todo el contenido del tamiz a un vaso de precipitados de masa conocida y péselo con una balanza.
6.4.3. Cálculos
La finura se calcula según la fórmula 2.
Fórmula 2. Finura
X2 = [(100 – metro3) / 100] × 100
X2 = 100 – metro3
Leyenda:
X2:finura, %;
metro3:Masa del tamiz, g.
El resultado se expresa como un número entero (en %).
7. Reglamento de Inspección
7.1. Confirmación de lote
La unidad de producción es responsable de confirmar el número de lote del producto de acuerdo con sus reglas correspondientes, y la calidad de los productos del lote debe ser uniforme.
7.2. Regulaciones de muestreo y tamaño de la muestra
7.2.1. La muestra debe distribuirse uniformemente a lo largo del proceso de llenado, o distribuirse uniformemente en el producto terminado después del enlatado.
7.2.2. Deben adoptarse métodos apropiados para garantizar la representatividad del muestreo y la limpieza del sitio de muestreo y la botella de muestreo. La toma de muestras para análisis microbiológicos debe realizarse de forma aséptica.
7.2.3. Consulte la Tabla 2 para conocer el tamaño de la muestra del muestreo del producto terminado. El tamaño de muestra a muestrear puede implementarse de acuerdo con el tamaño de lote estimado en la Tabla 2, o puede ser determinado por el fabricante y (o) partes relacionadas. El volumen de muestreo del lote no debe ser inferior a 300 ml (o 300 g), y aquellas muestras que carezcan del volumen necesario deben agregarse en la proporción adecuada.
Tabla 2 Tamaño de la muestra del producto terminado
Lote / Barril de Caja | Tamaño de muestra/barril o bolsa |
< 50 | 2 |
51 – 500 | 3 |
> 500 | 4 |
Nota 1:El lote se refiere al número de unidades de productos básicos contenidos en el lote, en barriles o cajas. Nota 2:El tamaño de la muestra se refiere al número de unidades de muestra contenidas en la muestra, en barriles o bolsas. | |
7.3. Clasificación de inspección
7.3.1. Inspección de fábrica (saliente)
7.3.1.1. Antes de que el producto salga de fábrica, el departamento de supervisión e inspección de calidad del fabricante debe realizar una inspección lote por lote de acuerdo con las disposiciones de esta norma. Si la inspección califica y se adjunta un certificado de inspección de calidad, el producto puede enviarse.
7.3.1.2. Elementos de inspección: apariencia, actividad enzimática, pérdida por secado (sólido) y colonias totales de productos de Clase A.
7.3.2. Tipo Inspección
7.3.2.1. Elementos de inspección: todos los elementos requeridos en esta norma.
7.3.2.2. En circunstancias normales, la inspección de tipo del mismo tipo de producto debe implementarse al menos una vez al año y debe implementarse si ocurre una de las siguientes condiciones:
una. Cuando hay cambios importantes en las materias primas (y auxiliares);
b. Al cambiar procesos o equipos clave;
C. Cuando se reanude la producción del nuevo producto reactivo o del producto producido normalmente después de haber estado suspendida por 3 meses;
d. Cuando hay una gran diferencia entre la inspección de fábrica y el resultado de la inspección de tipo más reciente;
y. Cuando la agencia nacional de supervisión e inspección de calidad necesita una inspección aleatoria de acuerdo con las regulaciones pertinentes.
7.4. Reglamento de Sentencia
7.4.1. Cuando la inspección de fábrica y (o) la inspección de tipo están calificadas, el departamento de inspección de calidad debe emitir el certificado de inspección de calidad del producto.
7.4.2. Cuando la inspección de fábrica y (o) la inspección de tipo no estén calificadas, duplique el análisis de la muestra en función del lote original. Si aún no está calificado, se considera que el producto no está calificado y no debe enviarse.
8. Iconos, Embalaje, Transporte y Almacenamiento
8.1. Iconos
8.1.1. El embalaje exterior del producto debe utilizar los iconos que cumplan los requisitos de GB/T 191.
8.1.2. El embalaje del producto debe estar adherido con una etiqueta firme. El contenido de los íconos debe incluir el nombre del producto, lugar de origen, nombre de la planta, especificaciones (actividad enzimática), fecha de producción, número de lote o código, vida útil, etc.
8.2. embalaje
El empaque interno del producto y (o) el revestimiento interno del contenedor del empaque deben usar los materiales aprobados por el estado, y los productos de Clase A deben usar materiales que cumplan con los estándares de higiene correspondientes del empaque de alimentos/contenedores de alimentos.
8.3. Transporte
El producto debe manipularse con cuidado durante el transporte para evitar la lluvia y la exposición a la luz solar. Los vehículos y herramientas de transporte deben ser limpios, no tóxicos y no contaminantes. Está estrictamente prohibido mezclar y transportar con sustancias tóxicas, nocivas y corrosivas.
8.4. Almacenamiento
El producto debe almacenarse en un ambiente fresco y seco. Está estrictamente prohibido almacenarlo con sustancias tóxicas, nocivas y corrosivas.
9. Fecha de caducidad (vida útil)
9.1. En condiciones de refrigeración de 4 ºC – 8 ºC, la vida útil de la preparación líquida de enzimas es de 90 días como mínimo. A 25 ºC, la vida útil de la preparación enzimática sólida es de 180 días como mínimo. La empresa debe indicar específicamente la vida útil de acuerdo con los requisitos enumerados anteriormente. La actividad enzimática medida durante la vida útil no debe ser inferior a la actividad enzimática indicada.
9.2. Los preparados enzimáticos se fabrican con sustancias biológicamente activas. Además de la vida útil, la actividad de la enzima puede reducirse durante el período de almacenamiento, pero aún tiene valor de uso.
